在大鲵产卵前，两条亲鲵会咬在一起，即使用手电光照射也不分开。如果松开后发现唇上没有伤痕，就可以初步判断为产卵前性行为。大鲵产卵时，雌鲵会附在岩石或木块上产卵，并且还有护卵行为，如果遇到敌害时，会比平时警惕凶恶许多，当幼鲵长到4-5厘米时便会进入冬眠。
一、大鲵的雌雄鉴别
1、辨别大鲵雌雄主要是从泄殖孔的特征来鉴别，尤其在生殖季节更为明显。在繁殖季节，雄性大鲵的泄殖腔腺为饱满的大豆瓣状，形成隆起的纵椭圆环形，十分明晰，将泄殖孔包绕于其中，并且泄殖孔外缘有一圈不规则的肉质状小突起。雌性生殖孔多为圆形，孔径相对较小，生殖孔两侧没有白色突起，孔外缘平滑，内缘可见两侧的皮层形成向腔面突出的皱折。在非繁殖期，雌雄大鲵的泄殖孔差别不大，也不容易区分。
2、解剖泄殖孔周围发现，雄性隆起处皮下有一对瓣状腺体——泄殖腔腺，而雌性的泄殖孔周围皮下是少量的结缔组织。处于非繁殖期和性未成熟的大鲵，雄性的泄殖孔周围没有明显的隆起，而泄殖腔腺体则较小，为扁条状不形成环状。另外，在行为方面，生殖季节雌性较为凶顽，雄性则较为温顺。
二、大鲵的雌雄性比
1、统计繁殖期的性比关系，在某种意义上说，可预测大鲵的繁殖能力。
2、据相关的统计，在自然状况下大鲵的性比接近于相等，这对天然资源增殖是有利的。另据陕西城固县大鲵研究所无选择地捕捉并解剖发现，在繁殖期，雄性比雌性略多一些。
三、大鲵的性腺发育和年周期
大鲵孵化出后在自然环境中生长5年，体长达400mm左右，体重在360g以上，性腺基本发育成熟。
四、大鲵怀卵量与体重的关系
1、大鲵每年产卵1次，怀卵量的多少直接决定了大鲵的繁殖力大小，大鲵的怀卵量一般不大，怀卵量与年龄、营养条件密切相关，变化大。
2、城固县大鲵研究所的结果表明，1.5-2.5公斤的大鲵怀卵为400-600枚。观察结果表明，大鲵的绝对怀卵量是随着体重的增加而增加的，相对怀卵量是随着体重的增加而减少的。体重在615-1000g之间的大鲵，怀卵量相对是最高的。
五、大鲵的繁殖行为
1、据野外观察，在大鲵产卵前，2条亲鲵口与口咬合，雄鲵主动咬合雌鲵上嘴唇，雌鲵咬合雄鲵下嘴唇，两条大鲵的身体大致直线，不停地左右摆动，摆动频率约为35-40次/min，即使用手电光照射也不会分离。
2、声音和振动使其分离后，会立即咬上，猛烈扭动身体，保持3-4小时才松开。松开后嘴唇上没有伤痕，可以排除争斗的可能性，初步认定为产卵前性行为。
3、在大鲵产卵前，由雄鲵游到雌性栖息地，选用水深1m左右的隧道状洞穴，清水可从洞口流入其中。雄鲵进入洞穴，用脚尾和头部清洁洞口。
4、在大鲵产卵时，雌鲵会将卵带的一端粘附在岩石或木块等附着物上，边爬边产卵。此时，雄鲵去受精后，将卵带缠绕在身体上孵化，或者留在洞里保护受精卵。
5、根据观察，大鲵有保护卵的行为，在洞里保护卵，遇到敌人就出来攻击，比平时更加警惕凶恶。野外见过1公斤左右的亲鲵攻击比它大1倍的个体，在保护卵的时候用饵料（青蛙和小鱼）向外钓拉，大鲵立即松口而不会被拉出洞外，这和非繁殖期截然不同。另一亲鲵在产卵附近洞中居住，有时也有护卵行为。
6、野外大鲵孵化期为35-42天，同窝卵的孵出日期也不同，可相差几天。当年幼鲵长到4-5cm即进入冬眠，同一洞中可见数十尾幼鲵群居，有时可见亲鲵与幼鲵在一起冬眠。
